BioChek 禽白血病（ALV）p27抗原检测试剂盒

产品代码 CK422B

禽白血病（ALV）p27 抗原检测ELISA 试剂盒，可以从鸡的不同样品中检测病毒的数量。酶标板用抗p27 抗体包被，将待检样品加入到酶标板孔中，含有p27 的抗原将结合上去，形成抗原抗体复合物。非特异性的抗原和其它的样品蛋白被洗去。将用碱性磷酸酶标记的抗p27 抗体加到孔中，结合到最初与抗体结合的p27 抗原上，然后再洗去未反应的结合物。PNPP显色剂作为底物被加入，如果p27 抗原存在，则显黄色，颜色强度直接与在样品中的p27抗原数量有关系。

提供的试剂

P27包被板 （Coated plates）: 包被P27抗体的微量板。

酶标二抗 (Conjugate reagent) :抗P27碱性磷酸酶标记物：内含蛋白稳定剂和叠氮化钠防腐剂（0.1% 重量/体积）及红色染料的磷酸盐缓冲液。

底物片(Substrate tablets) PNPP（4-硝基苯磷酸二钠盐）：用底物缓冲液溶解后使用。

底物缓冲液(Substrate buffer):含有与酶反应相关物质的二乙醇胺缓冲液。

终止液(Stop Solution):含有NaOH的二乙醇胺缓冲液。

样品稀释液(Sample Diluent):含有蛋白稳定剂和叠氮化钠（0.1% 重量/体积）的磷酸盐缓冲液。

洗液(Wash Buffer):含有吐温的磷酸盐缓冲液（粉）。

阴性对照(Negative Control):阴性培养物磷酸盐缓冲液：内含有蛋白稳定剂和叠氮化钠防腐剂（0.1% 重量/体积）及蓝色染料。

阳性对照(Positive Control):含特异性P27 抗原的磷酸盐缓冲液：内含有蛋白稳定剂和叠氮化钠防腐剂（0.1% 重量/体积）及红色染料。

材料和设备要求（试剂盒未提供）

精确的微量移液器和一次性的吸头

8 或12 道的微量移液器

稀释样品的塑料管

蒸馏水或去离子水

含405nm 波长的酶标仪

微量板冲洗仪

注意事项

1．处理各种试剂要小心。终止液中含有腐蚀性的强碱，如果溅到皮肤或眼中，用大量的清水洗涤。

2．把各种生物材料都看成具有潜在的生物危险性，包括所有的外来样品。在销毁之前，要用漂白粉或其它强氧化剂，把用过的反应板和废弃液进行消毒。

3．不要用嘴吸液。在使用试剂盒中的试剂和处理样品的地方，不要吃东西，喝水或吸烟。

4．该试剂盒只供外用。

5．严格按照检测规程操作才能够取得最好的结果。

试剂的准备

1． 底物试剂：取1 片底物放入洁净容器中，加入5.5-6ml 的底物缓冲溶液，混合直到完全溶解。本试剂最好是现用现配，也可以在+4℃下避光保存1 周。

注意不要用手直接碰触底物片。

2．洗液：将一小袋洗涤液完全倒入1 升蒸馏水或去离子水中，混合使其完全溶解。

3．试剂盒中的其它成分可以直接使用。使用前要回温至室温（22-27℃）。

样品的准备

1．蛋清样品在检测中可直接用原液（即不需要稀释，如果比较粘稠，可以冻融一次后再检测）。

2．棉拭子或胎粪样品加入到1mlPBS 缓冲液（或洗涤液）中，并且在检测之前要充分振荡（反复冻融可以暴露更多的抗原）。

3．每份样品都要用一个未使用过的新的吸头。

试剂盒中的阳性和阴性对照不要稀释！

操作步骤

1．从密封袋中取出用抗p27 抗体包被的酶标板，在记录纸上标记样品的位置。

2．加50μl 样品到相应酶标板孔中。

3．在A12 和B12 中加入50μl 的阴性对照。

4．在C12 和D12 中加入50μl 的阳性对照。

5．用盖子盖住酶标板，在室温（22-27℃）下孵育60 分钟。

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