猪蓝耳病毒IgG抗体检测试剂盒，用于检测猪血清、血浆中猪蓝耳病毒抗体，可用于猪蓝耳病毒疫苗免疫效果评价。

产品名称：

通用名：猪蓝耳病毒IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名：Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus (ELISA)

包装规格： 96T×2/盒、96T×5/盒

检测原理：

猪蓝耳病又称猪的繁殖与呼吸综合征（PRRS），是利用间接ELISA方法建立的。特异的PRRSV被包被在96孔板上。在反应过程中，检测样本被加入反应孔中，样本中的特异性抗体会与孔中包被的特异性抗原反应，在洗板的过程中不会被清洗掉，当添加酶标复合物时，这些酶标复合物就会与猪的抗体发生反应。没有结合的酶标复合物在洗板的过程中被清洗。在加入对氧化酶敏感的可以显色底物。显色的颜色深浅与样本所含PRRSV的抗体浓度成正比。

试剂盒组成： (460个检测)

在试剂盒的液体中使用了硫柳汞等防腐剂。

储存及有效期：

于2～8℃避光保存，有效期为12个月。

包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。

用前准备：

1.仔细阅读说明书，所有试剂在2-8℃条件下保存。不用时，所有的板条一定要用用封口膜密封，并存放在封口的塑料小袋中，防止潮气对包被板的损伤。尽管在生产过程中，包被的抗原已经被灭活，但包被的抗原仍被视为病毒的潜在来源。不要使底物接触强光和氧化物。

2.TMB是一种敏感度很高的底物，取出后，不得再加回瓶中，试剂瓶中已多备了25%的试剂，完全够用。不要使用过期的成分或者不同批次试剂混合使用成分。注意加样和冲洗，以确保试验的精确度和准确度。不能用嘴吸液。操作过程中使用手套，终止液是一种硫酸，具有腐蚀性，使用时要小心。所有的废液要经过处理和净化。本品为兽用产品。

3.如果正确保存，没有打开的试剂，在到达标签指示的有效期时，也是很稳定的。

检验方法：

1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。

3.空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。

4.混匀，置37℃反应30分钟。

5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。

6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。

7.洗涤，同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。

参考值：

实验正常的情况下，阴性对照≤0.10，阳性对照≥0.6。

检验结果的解释：

1.样品A值≥0.38为阳性；样品A值在0.2到0.38之间为可疑；样品A值＜0.2为阴性。

2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。

试验方法的局限性：

该试验仅作为定性检测猪血清、血浆中猪蓝耳病毒抗体，根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。

注意事项：

1.实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。

2.终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

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