BioChek蓝耳病抗体（PRRSV）抗体检测试剂盒

货号：SK103

PRRSV ELISA抗体检测试剂盒，可用于检测猪血清中蓝耳病抗体的含量。此试剂盒包被的抗原是灭活的蓝耳病。血清稀释后加入到微量板中，蓝耳病抗体与微量板中的抗原结合，形成抗原抗体复合物。非特异的反应或血清其他蛋白通过洗板可将其洗脱掉，将碱性磷酸酶标记的抗猪的抗体加到孔中，与抗原抗体复合物结合，然后再洗去未反应的结合物。PNPP显色剂作为底物被加入，呈现黄颜色反应。颜色强度直接与样品中的抗PRRSV抗体的数量有关系。

【提供的试剂】

包被板（Coated plates）：包被灭活PRRSV的微量板。

酶标二抗(Conjugate reagent)：碱性磷酸酶标记的抗猪抗体：内含蛋白稳定剂和叠氮化钠防腐剂（0.1% 重量/体积）及红色染料的磷酸盐缓冲液。

底物片(Substrate tablets) PNPP（4-硝基苯磷酸二钠盐）：用底物缓冲液溶解后使用。

底物缓冲液(Substrate buffer)：含有与酶反应相关物质的二乙醇胺缓冲液。

终止液(Stop Solution)：含有NaOH的二乙醇胺缓冲液。

样品稀释液(Sample Diluent)：含有蛋白稳定剂和叠氮化钠（0.1%  重量/体积）的磷酸盐缓冲液。

洗液(Wash Buffer)：含有吐温的磷酸盐缓冲液（粉）。

阴性对照(Negative Control)：灭活的无PRRS抗体的磷酸盐缓冲液：内含有蛋白稳定剂和叠氮化钠防腐剂（0.1% 重量/体积）及蓝色染料。

阳性对照(Positive Control)： 含特异性PRRS抗体的磷酸盐缓冲液：内含有蛋白稳定剂和叠氮化钠防腐剂（0.1% 重量/体积）及红色染料。

【材料和设备要求（试剂盒未提供）  】                                                                          

精确的一次性吸头

8道或12道微量移液器

含405nm波长的酶标仪

洗板机

【注意事项】

       1．处理各种试剂要小心。终止液中含有腐蚀性的强碱，如果溅到皮肤或眼中，用大量的清水洗涤。

2．把各种生物材料都看成具有潜在的生物危险性，包括所有的外来样品。在销毁之前，要用漂白粉或其它强氧化剂，把用过的反应板和废弃液进行消毒。

3．不要用嘴碰移液器。在使用试剂盒中的试剂和处理样品的地方，不要吃东西，喝水或吸烟。

4．试剂盒仅供体外使用。

5．严格按照检测规程操作才能够取得最好的结果。

【试剂的准备】

1．底物试剂：取1 片底物放入洁净容器中，加入5.5ml的底物缓冲溶液，要求混合3分钟直到完全溶解。本试剂最好是现用现配，配置好的底物溶液可以在+4℃下避光保存1周。请勿用手直接触拿底物片。

2．洗液：将一小袋洗液完全倒入1升蒸馏水或去离子水中，混合使其完全溶解。洗液

可在+4℃保存1个月。

3．试剂盒中的其它成分可以直接使用。使用前要回温至室温（22-27℃）。

【样品的准备】

每个样品按照1：50稀释，即5μl样品加245ul的样品稀释液；样品可以在记录好的稀释板中进行稀释，同时在纸上记录样品及对照的顺序。

1、  轻拍稀释板的边缘，以便对稀释的样品进行很好的混合。

2、  每个样品使用干净的洗头。

阴阳对照不用稀释，可直接使用。

【操作步骤】

1．  拆开PRRS抗原包被板，记录样品的位置。

2．  在A1和B1孔中加入100ul阴性对照血清。

3．  在C1和D1孔中加入100ul阳性对照血清。

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